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RRB LA UT13 | Clinical Microbiology Practice Test 2: Staining Principles

Q1. What is the primary stain used in the standard Gram staining procedure?

A) Safranin

B) Malachite green

C) Methylene blue

D) Crystal violet

Q1. मानक ग्राम अभिरंजन (Gram staining) प्रक्रिया में प्रयुक्त प्राथमिक अभिरंजक (Primary stain) कौन-सा है?

A) सैफ्रानिन

B) मैलाकाइट ग्रीन

C) मिथाइलीन ब्लू

D) क्रिस्टल वायलेट

Answer: (D)

Crystal violet is the basic triphenylmethane dye used as the primary stain in Gram staining, which stains all bacterial cells purple initially.

क्रिस्टल वायलेट ग्राम अभिरंजन में प्रयुक्त प्राथमिक अभिरंजक है, जो प्रारंभ में सभी जीवाणु कोशिकाओं को बैंगनी रंग में रंग देता है।

Q2. What is the chemical function of Gram's iodine during the Gram staining procedure?

A) Decolorizing lipid membranes

B) Counterstaining Gram-negative bacteria pink

C) Acting as a mordant to form an insoluble crystal violet-iodine complex

D) Fixing bacterial smears thermally to glass slides

Q2. ग्राम अभिरंजन प्रक्रिया के दौरान ग्राम आयोडीन का रासायनिक कार्य क्या है?

A) लिपिड झिल्लियों का रंग हटाना

B) ग्राम-नेगेटिव जीवाणुओं को गुलाबी रंग में रंगना

C) मॉर्डेंट (Mordant) के रूप में कार्य कर अघुलनशील क्रिस्टल वायलेट-आयोडीन कॉम्प्लेक्स बनाना

D) जीवाणु स्मीयर को कांच की स्लाइड पर ऊष्मा द्वारा स्थिर (Heat fix) करना

Answer: (C)

Gram's iodine acts as a chemical mordant. It forms large, water-insoluble crystal violet-iodine (CV-I) complexes within the bacterial peptidoglycan layer.

ग्राम आयोडीन एक मॉर्डेंट के रूप में कार्य करता है और पेप्टिडोग्लाइकन परत के भीतर क्रिस्टल वायलेट के साथ मिलकर एक बड़ा, अघुलनशील CV-I कॉम्प्लेक्स बनाता है।

Q3. Which reagent is most commonly used as the differential decolorizer in routine Gram staining?

A) 95% Ethyl alcohol or acetone-alcohol mixture

B) 20% Sulfuric acid

C) Distilled water

D) 1% Hydrochloric acid

Q3. मानक ग्राम अभिरंजन में विभेदक रंगहरणकर्ता (Decolorizer) के रूप में सामान्यतः किस रसायन का उपयोग किया जाता है?

A) 95% एथिल अल्कोहल या एसीटोन-अल्कोहल मिश्रण

B) 20% सल्फ्यूरिक एसिड

C) आसुत जल

D) 1% हाइड्रोक्लोरिक एसिड

Answer: (A)

95% ethyl alcohol or an acetone-alcohol mixture dissolves the lipid-rich outer membrane of Gram-negative bacteria, washing out the CV-I complex.

95% एथिल अल्कोहल या एसीटोन-अल्कोहल ग्राम-नेगेटिव जीवाणुओं की लिपिड युक्त बाहरी झिल्ली को घोलकर CV-I कॉम्प्लेक्स को बाहर निकाल देता है।

Q4. What color do Gram-negative bacteria appear following completion of the Gram staining protocol?

A) Dark purple to blue

B) Colorless and transparent

C) Bright yellow

D) Pink to red

Q4. ग्राम अभिरंजन प्रोटोकॉल पूरा होने के बाद ग्राम-नेगेटिव जीवाणु किस रंग के दिखाई देते हैं?

A) गहरा बैंगनी से नीला

B) रंगहीन और पारदर्शी

C) चमकीला पीला

D) गुलाबी से लाल

Answer: (D)

Gram-negative bacteria lose the primary stain during alcohol decolorization and take up the counterstain (safranin or dilute carbol fuchsin), appearing pink to red.

ग्राम-नेगेटिव जीवाणु अल्कोहल रंगहरण के दौरान प्राथमिक रंग खो देते हैं और काउंटरस्टेन (सैफ्रानिन) को ग्रहण करके गुलाबी या लाल दिखाई देते हैं।

Q5. Which structural difference between Gram-positive and Gram-negative cell walls is directly responsible for differential Gram decolorization?

A) Presence of nuclear histones in Gram-positive cells

B) Absence of ribosomes in Gram-negative bacteria

C) Thick peptidoglycan layer without outer membrane in Gram-positive versus thin peptidoglycan with high lipid outer membrane in Gram-negative

D) Thickness of bacterial flagella fibers

Q5. ग्राम-पॉजिटिव और ग्राम-नेगेटिव कोशिका भित्ति के बीच कौन-सा संरचनात्मक अंतर ग्राम रंगहरण (Decolorization) के लिए मुख्य रूप से उत्तरदायी है?

A) ग्राम-पॉजिटिव कोशिकाओं में केंद्रकीय हिस्टोन की उपस्थिति

B) ग्राम-नेगेटिव जीवाणुओं में राइबोसोम की अनुपस्थिति

C) ग्राम-पॉजिटिव में बाहरी झिल्ली रहित मोटी पेप्टिडोग्लाइकन परत बनाम ग्राम-नेगेटिव में पतली पेप्टिडोग्लाइकन एवं उच्च लिपिड युक्त बाहरी झिल्ली

D) जीवाणु फ्लैजेला तंतुओं की मोटाई

Answer: (C)

Gram-positive bacteria possess a thick, highly cross-linked peptidoglycan layer that dehydrates and traps CV-I complexes, whereas Gram-negative cells have thin peptidoglycan and a lipid outer membrane extracted by alcohol.

ग्राम-पॉजिटिव भित्ति में मोटी क्रॉस-लिंक्ड पेप्टिडोग्लाइकन परत होती है जो संकुचित होकर CV-I को रोक लेती है, जबकि ग्राम-नेगेटिव में पतली पेप्टिडोग्लाइकन और घुलनशील लिपिड परत होती है।

Q6. What artifact occurs if a bacterial smear is over-decolorized with acetone-alcohol during Gram staining?

A) Gram-positive bacteria falsely appear Gram-negative (pink)

B) Gram-negative bacteria falsely appear Gram-positive (purple)

C) All bacterial cells disappear from the slide

D) Bacterial spores turn fluorescent green

Q6. यदि ग्राम अभिरंजन के दौरान जीवाणु स्मीयर का एसीटोन-अल्कोहल से अत्यधिक रंगहरण (Over-decolorization) हो जाए, तो कौन-सी कृत्रिम त्रुटि (Artifact) उत्पन्न होगी?

A) ग्राम-पॉजिटिव जीवाणु गलत तरीके से ग्राम-नेगेटिव (गुलाबी) दिखाई देंगे

B) ग्राम-नेगेटिव जीवाणु गलत तरीके से ग्राम-पॉजिटिव (बैंगनी) दिखाई देंगे

C) सभी जीवाणु कोशिकाएं स्लाइड से गायब हो जाएंगी

D) जीवाणु अंतःबीजाणु फ्लोरोसेंट हरे हो जाएंगे

Answer: (A)

Over-decolorization strips the crystal violet-iodine complex even from the thick peptidoglycan layer of Gram-positive cells, causing them to counterstain pink like Gram-negative bacteria.

अत्यधिक रंगहरण से ग्राम-पॉजिटिव कोशिकाओं की मोटी पेप्टिडोग्लाइकन परत से भी CV-I कॉम्प्लेक्स धुल जाता है, जिससे वे काउंटरस्टेन लेकर झूठे गुलाबी दिखने लगते हैं।

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